abo血型的特點,人類ABO血型鑒定
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2023-07-22
01
ABO血型分類
A: 紅細(xì)胞中含A抗原、血清中含抗B抗體
B: 紅細(xì)胞中含B抗原、血清中含抗A抗體
AB:紅細(xì)胞中含A抗原、B抗原血清中無抗體
O:紅細(xì)胞中無抗原、血清中含抗A和抗B抗體
02
ABO血型檢測原理
血型抗原與相應(yīng)抗體在反應(yīng)介質(zhì)中形成紅細(xì)胞和相應(yīng)血型抗體結(jié)合的免疫復(fù)合物,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。分為正向定型和反向定型。正向定型指已知的特異性抗體(標(biāo)準(zhǔn)血清)檢查紅細(xì)胞的未知抗原。反向定型指已知的血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中的未知抗體。
ABO血型鑒定方法
1.鹽水介質(zhì)法(salt medium test)
原理:根據(jù)IgM類抗體與紅細(xì)胞膜上特異性抗原能發(fā)生凝集反應(yīng)。
正定型:已知血型抗體試劑+紅細(xì)胞
鑒定紅細(xì)胞上血型抗原
反定型:已知標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞+血清
鑒定血清中抗體
反應(yīng)條件:生理鹽水介質(zhì),室溫,肉眼可見凝集反應(yīng)。
平板法,試管法,微孔板法,試管離心法最可信賴。
應(yīng)用: ABO血型定型、RhD抗原定型
(IgG+IgM, IgM單克隆抗體),交叉合血
結(jié)果判斷:
2.玻片法
實驗材料:
1)診斷用抗A及抗B單克隆抗體試劑各一支。
2)玻片、無菌刺血針、消毒用碘酒、酒精、無菌棉簽、牙簽,記號筆等。
實驗方法
1)取潔凈玻片一張用蠟筆分成兩半,分別標(biāo)記A、B,然后A側(cè)滴一滴抗A抗體(藍色),B側(cè)滴一滴抗B抗體(黃色)。
2)被檢者耳垂或手指用碘酒消毒,酒精脫碘并涼干后,用刺血針刺血。
3)用牙簽刮取兩滴血液充分與兩種抗體混勻,即可觀察結(jié)果
實驗結(jié)果
血型鑒定結(jié)果
注意事項
1.A、B兩側(cè)不能混,否則結(jié)果不可靠。
2.無菌觀念:消毒按一定方向,以一點為中心,由內(nèi)向外;注意酒精脫碘,否則損傷皮膚、色素沉著;酒精脫碘后,要晾干,否則進針會有燒灼疼痛。
3.流式細(xì)胞技術(shù)
實驗步驟
(1)稀釋: 將待測血樣的紅細(xì)胞用生理鹽水稀釋成百分之五的紅細(xì)胞懸液。
(2)標(biāo)記: 分裝各管分別等比加入熒光素標(biāo)記抗體,避光放置15min待受檢紅細(xì)胞上的血 型抗原與相應(yīng)熒光標(biāo)記抗體結(jié)合后,用生理鹽水洗滌離心除去未結(jié)合抗體。
(3)檢測: 重懸后立即用流式細(xì)胞儀檢測與熒光標(biāo)記抗體結(jié)合的紅細(xì)胞,通過軟件分析, 從而得到待測樣本的紅細(xì)胞血型。
優(yōu)勢
在細(xì)胞分型方面具有速度快、靈敏度高、特異性好,檢測結(jié)果準(zhǔn)確,重復(fù)性好的優(yōu)點。特別適合應(yīng)用于ABO血型亞型的快速鑒定。目前有研究指出流式細(xì)胞技術(shù)亦可通過分離孕婦血液中的胎兒紅細(xì)胞用于產(chǎn)前非侵入性胎兒血型檢測。質(zhì)量控制
1)標(biāo)準(zhǔn)血清
①要求:新鮮,在有效期內(nèi),效價高,凝集力強,嚴(yán)防污染。
②常用的抗血清有:人血清ABO血型抗體:穩(wěn)定性高,已滅活補體。
人ABO血型單克隆抗體:穩(wěn)定性較人血清抗體的穩(wěn)定性2)被檢紅細(xì)胞
i)標(biāo)本新鮮,嚴(yán)防污染。
ii)某些疾病出現(xiàn)假凝集,可加做自身血清和紅細(xì)胞,自身紅細(xì)胞和生理鹽水對照試驗及結(jié)合反定型結(jié)果進行鑒定。
iii)當(dāng)疑有血漿成分干擾血型鑒定時可用生理鹽水反復(fù)洗滌紅細(xì)胞以除干擾。
3)試驗器材
i)器材清潔、干燥、標(biāo)記清楚。
ii)用試管法定型時,應(yīng)同時進行正向和反向定型。須設(shè)置對照。
iii)紅細(xì)胞濃度按要求配置,紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體的比例適當(dāng)。
iiii)弱A亞型和弱B亞型,肉眼判斷必同時須用顯微鏡復(fù)查。
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